යුනිකොනසෝල් වල ක්‍රියාකාරිත්වය

       යුනිකොනසෝල්ට්‍රයිසෝල් වේශාක වර්ධන නියාමකයශාක උස නියාමනය කිරීමට සහ බීජ පැළ අධික ලෙස වර්ධනය වීම වැළැක්වීමට බහුලව භාවිතා වේ. කෙසේ වෙතත්, යුනිකොනසෝල් බීජ පැල හයිපොකොටයිල් දිගු වීම වළක්වන අණුක යාන්ත්‍රණය තවමත් පැහැදිලි නැත, සහ හයිපොකොටයිල් දිගු වීමේ යාන්ත්‍රණය විමර්ශනය කිරීම සඳහා ට්‍රාන්ස්ක්‍රිප්ටෝම් සහ පරිවෘත්තීය දත්ත ඒකාබද්ධ කරන අධ්‍යයන කිහිපයක් පමණි. මෙහිදී, චීන මල් පිපෙන ගෝවා බීජ පැලවල යුනිකොනසෝල් හයිපොකොටයිල් දිගු වීම සැලකිය යුතු ලෙස වළක්වන බව අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු. සිත්ගන්නා කරුණ නම්, ඒකාබද්ධ ට්‍රාන්ස්ක්‍රිප්ටෝම් සහ පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණය මත පදනම්ව, යුනිකොනසෝල් “ෆීනයිල්ප්‍රොපනොයිඩ් ජෛව සංස්ලේෂණය” මාර්ගයට සැලකිය යුතු ලෙස බලපාන බව අපට පෙනී ගියේය. මෙම මාර්ගයේදී, ලිග්නින් ජෛව සංස්ලේෂණයට සම්බන්ධ වන එන්සයිම නියාමන ජාන පවුලේ එක් ජානයක් වන BrPAL4 සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කරන ලදී. ඊට අමතරව, යීස්ට් එක්-දෙමුහුන් සහ ද්වි-දෙමුහුන් පරීක්ෂණ මගින් පෙන්නුම් කළේ BrbZIP39 හට BrPAL4 හි ප්‍රවර්ධක කලාපයට සෘජුවම බන්ධනය වී එහි පිටපත් කිරීම සක්‍රීය කළ හැකි බවයි. වෛරස්-ප්‍රේරිත ජාන නිහඬ කිරීමේ පද්ධතිය තවදුරටත් ඔප්පු කළේ BrbZIP39 චීන ගෝවා වල හයිපොකොටයිල් දිගු වීම සහ හයිපොකොටයිල් ලිග්නින් සංස්ලේෂණය ධනාත්මකව නියාමනය කළ හැකි බවයි. මෙම අධ්‍යයනයේ ප්‍රතිඵල චීන ගෝවා වල හයිපොකොටයිල් දිගු වීම වැළැක්වීමේදී ක්ලොකොනසෝල් හි අණුක නියාමන යාන්ත්‍රණය පිළිබඳ නව අවබෝධයක් ලබා දෙයි. BrbZIP39-BrPAL4 මොඩියුලය මගින් මැදිහත් වූ ෆීනයිල්ප්‍රොපනොයිඩ් සංස්ලේෂණය නිෂේධනය කිරීමෙන් ක්ලොකොනසෝල් ලිග්නින් අන්තර්ගතය අඩු කළ බවත්, එමඟින් චීන ගෝවා බීජ පැලවල හයිපොකොටයිල් වාමන වීමට හේතු වන බවත් පළමු වරට තහවුරු විය.

චීන ගෝවා (Brassica campestris L. ssp. chinensis var. utilis Tsen et Lee) Brassica කුලයට අයත් වන අතර එය මගේ රටේ බහුලව වගා කරන ප්‍රසිද්ධ වාර්ෂික කුරුස එළවළුවකි (Wang et al., 2022; Yue et al., 2022). මෑත වසරවලදී, චීන වට්ටක්කා නිෂ්පාදන පරිමාණය අඛණ්ඩව පුළුල් වී ඇති අතර, වගා ක්‍රමය සාම්ප්‍රදායික සෘජු බීජ වැපිරීමේ සිට දැඩි බීජ පැළ වගා කිරීම සහ බද්ධ කිරීම දක්වා වෙනස් වී ඇත. කෙසේ වෙතත්, දැඩි බීජ පැළ වගා කිරීමේ සහ බද්ධ කිරීමේ ක්‍රියාවලියේදී, අධික හයිපොකොටයිල් වර්ධනය කකුල් සහිත බීජ පැල නිපදවීමට නැඹුරු වන අතර එමඟින් බීජ පැළවල ගුණාත්මකභාවය දුර්වල වේ. එබැවින්, අධික හයිපොකොටයිල් වර්ධනය පාලනය කිරීම දැඩි බීජ පැළ වගා කිරීමේ සහ චීන ගෝවා බද්ධ කිරීමේ හදිසි ගැටළුවකි. වර්තමානයේ, හයිපොකොටයිල් දිගු කිරීමේ යාන්ත්‍රණය ගවේෂණය කිරීම සඳහා පිටපත් කිරීමේ විද්‍යාව සහ පරිවෘත්තීය දත්ත ඒකාබද්ධ කරන අධ්‍යයනයන් ස්වල්පයක් ඇත. චීන ගෝවා වල ක්ලෝරන්ටසෝල් හයිපොකොටයිල් ප්‍රසාරණය නියාමනය කරන අණුක යාන්ත්‍රණය තවමත් අධ්‍යයනය කර නොමැත. චීන ගෝවා වල යුනිකොනසෝල්-ප්‍රේරිත හයිපොකොටයිල් වාමනයට ප්‍රතිචාර දක්වන ජාන සහ අණුක මාර්ග හඳුනා ගැනීමට අපි ඉලක්ක කළෙමු. පිටපත් කිරීමේ සහ පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණයන් මෙන්ම යීස්ට් එක්-දෙමුහුන් විශ්ලේෂණය, ද්විත්ව ලුසිෆරේස් විශ්ලේෂණය සහ වෛරස්-ප්‍රේරිත ජාන නිශ්ශබ්ද කිරීම (VIGS) විශ්ලේෂණය භාවිතා කරමින්, චීන ගෝවා බීජ පැලවල ලිග්නින් ජෛව සංස්ලේෂණය නිෂේධනය කිරීමෙන් යුනිකොනසෝල් චීන ගෝවා වල හයිපොකොටයිල් වාමන වීම ඇති කළ හැකි බව අපි සොයා ගත්තෙමු. අපගේ ප්‍රතිඵල මගින් BrbZIP39–BrPAL4 මොඩියුලය මගින් මැදිහත් වන ෆීනයිල්ප්‍රොපනොයිඩ් ජෛව සංස්ලේෂණය නිෂේධනය කිරීම හරහා චීන ගෝවා වල හයිපොකොටයිල් දිගු වීම වළක්වන අණුක නියාමන යාන්ත්‍රණය පිළිබඳ නව අවබෝධයක් ලබා දේ. වාණිජ බීජ පැලවල ගුණාත්මකභාවය වැඩි දියුණු කිරීම සහ එළවළු වල අස්වැන්න සහ ගුණාත්මකභාවය සහතික කිරීම සඳහා දායක වීම සඳහා මෙම ප්‍රතිඵල වැදගත් ප්‍රායෝගික ඇඟවුම් තිබිය හැකිය.
පූර්ණ-දිග BrbZIP39 ORF pGreennll 62-SK තුළට ඇතුළු කර, ඵලදායිකය ජනනය කරන ලද අතර, BrPAL4 ප්‍රවර්ධක කොටස pGreennll 0800 luciferase (LUC) ඵලදායි ජානය ජනනය කිරීම සඳහා ඒකාබද්ධ කරන ලදී. ඵලදායිකය සහ ඵලදායි ජාන දෛශික දුම්කොළ (Nicotiana benthamiana) කොළ බවට සම-පරිවර්තනය කරන ලදී.
පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය සහ ජානවල සම්බන්ධතා පැහැදිලි කිරීම සඳහා, අපි ඒකාබද්ධ පරිවෘත්තීය සහ පිටපත් කිරීමේ විශ්ලේෂණයක් සිදු කළෙමු. KEGG මාර්ග පොහොසත් කිරීමේ විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කළේ DEGs සහ DAMs KEGG මාර්ග 33 කින් සම-පොහොසත් වී ඇති බවයි (රූපය 5A). ඒවා අතර, "ෆීනයිල්ප්‍රොපනොයිඩ් ජෛව සංස්ලේෂණය" මාර්ගය වඩාත් සැලකිය යුතු ලෙස පොහොසත් විය; "ප්‍රභාසංස්ලේෂණ කාබන් සවි කිරීමේ" මාර්ගය, "ෆ්ලේවනොයිඩ් ජෛව සංස්ලේෂණය" මාර්ගය, "පෙන්ටෝස්-ග්ලූකුරෝනික් අම්ල අන්තර් පරිවර්තන" මාර්ගය, "ට්‍රිප්ටෝෆාන් පරිවෘත්තීය" මාර්ගය සහ "පිෂ්ඨය-සුක්‍රෝස් පරිවෘත්තීය" මාර්ගය ද සැලකිය යුතු ලෙස පොහොසත් විය. තාප පොකුරු සිතියම (රූපය 5B) DEGs සමඟ සම්බන්ධ DAMs කාණ්ඩ කිහිපයකට බෙදා ඇති බව පෙන්නුම් කළ අතර, ඒවා අතර ෆ්ලේවනොයිඩ් විශාලතම කාණ්ඩය වූ අතර, එයින් පෙන්නුම් කරන්නේ "ෆීනයිල්ප්‍රොපනොයිඩ් ජෛව සංස්ලේෂණය" මාර්ගය හයිපොකොටයිල් වාමනවාදයේ තීරණාත්මක කාර්යභාරයක් ඉටු කළ බවයි.
කතුවරුන් ප්‍රකාශ කරන්නේ මෙම පර්යේෂණය සිදු කරන ලද්දේ විභව උනන්දුවක් ඇති ගැටුමක් ලෙස අර්ථ දැක්විය හැකි කිසිදු වාණිජ හෝ මූල්‍ය සම්බන්ධතාවක් නොමැති අවස්ථාවක බවයි.
මෙම ලිපියේ ප්‍රකාශිත සියලුම අදහස් කතුවරයාගේ පමණක් වන අතර අනුබද්ධ සංවිධාන, ප්‍රකාශකයින්, සංස්කාරකවරුන් හෝ සමාලෝචකයින්ගේ අදහස් අනිවාර්යයෙන්ම පිළිබිඹු නොකරයි. මෙම ලිපියේ ඇගයීමට ලක් කරන ලද ඕනෑම නිෂ්පාදනයක් හෝ ඒවායේ නිෂ්පාදකයින් විසින් කරන ලද හිමිකම් පෑමක් ප්‍රකාශකයා විසින් සහතික කර හෝ අනුමත කර නොමැත.