ඩෙලා ප්‍රෝටීන සංරක්ෂණය කර ඇත.වර්ධන නියාමකයින්අභ්‍යන්තර හා බාහිර සංඥා වලට ප්‍රතිචාර වශයෙන් ශාක සංවර්ධනයේ කේන්ද්‍රීය කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි. පිටපත් කිරීමේ නියාමකයින් ලෙස, DELLAs ඔවුන්ගේ GRAS වසම් හරහා පිටපත් කිරීමේ සාධක (TFs) සහ හිස්ටෝන් H2A සමඟ බන්ධනය වන අතර ප්‍රවර්ධකයන් මත ක්‍රියා කිරීමට බඳවා ගනු ලැබේ. මෑත අධ්‍යයනයන් පෙන්වා දී ඇත්තේ DELLA ස්ථායිතාව යාන්ත්‍රණ දෙකකින් පසු පරිවර්තනයෙන් පසු නියාමනය කරනු ලබන බවයි: ශාක හෝමෝනය මගින් ප්‍රේරණය කරන ලද බහු අවයවිකකරණයගිබෙරෙලින්, එය ඒවායේ වේගවත් හායනයට සහ කුඩා ubiquitin-සමාන විකරණකාරකය (SUMO) සමඟ සංයෝජනය වීමට හේතු වන අතර එමඟින් ඒවායේ සමුච්චය වැඩි වේ. එපමණක් නොව, DELLA ක්‍රියාකාරිත්වය ගතිකව වෙනස් ග්ලයිකෝසයිලේෂන් යාන්ත්‍රණ දෙකකින් නියාමනය කරනු ලැබේ: O-fucosylation DELLA-TF අන්තර්ක්‍රියා වැඩි දියුණු කරන අතර O-සම්බන්ධිත N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) වෙනස් කිරීම DELLA-TF අන්තර්ක්‍රියා වළක්වයි. කෙසේ වෙතත්, පෙර අධ්‍යයනයන් පරස්පර විරෝධී ප්‍රතිඵල පෙන්වා ඇති බැවින් DELLA පොස්පරීකරණයේ කාර්යභාරය අපැහැදිලි ය, සමහරු යෝජනා කරන්නේ පොස්පරීකරණය DELLA පරිහානිය ප්‍රවර්ධනය කරන හෝ මර්දනය කරන බවත් තවත් සමහරු යෝජනා කරන්නේ පොස්පරීකරණය ඔවුන්ගේ ස්ථායිතාවයට බලපාන්නේ නැති බවත්ය. මෙහිදී, අපි ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය මගින් Arabidopsis thaliana වලින් පවිත්‍ර කරන ලද GA1-3 මර්දනකය (RGA), AtDELLA හි පොස්පරීකරණ ස්ථාන හඳුනාගෙන PolyS සහ PolyS/T කලාපවල RGA පෙප්ටයිඩ දෙකක පොස්පරීකරණය H2A බන්ධනය සහ ඉලක්ක ප්‍රවර්ධක සමඟ RGA සම්බන්ධතාවය ප්‍රවර්ධනය කිරීමෙන් RGA ක්‍රියාකාරිත්වය වැඩි දියුණු කරන බව පෙන්වමු. විශේෂයෙන්, පොස්පරීකරණය RGA-TF අන්තර්ක්‍රියා හෝ RGA ස්ථායිතාවයට බලපා නැත. අපගේ අධ්‍යයනයෙන් පොස්පරීකරණය DELLA ක්‍රියාකාරිත්වය ඇති කරන අණුක යාන්ත්‍රණයක් හෙළි වේ.
අපගේ ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂ විශ්ලේෂණයෙන් හෙළි වූයේ GA- ඌන Ga1 පසුබිම තුළ Pep1 සහ Pep2 යන දෙකම RGA හි අධික ලෙස පොස්පරීකරණය කර ඇති බවයි. මෙම අධ්‍යයනයට අමතරව, පොස්පොප්‍රෝටීය අධ්‍යයනයන් මගින් RGA හි Pep1 පොස්පරීකරණය ද අනාවරණය කර ඇත, නමුත් එහි භූමිකාව තවමත් අධ්‍යයනය කර නොමැත53,54,55. ඊට වෙනස්ව, මෙම පෙප්ටයිඩය RGAGKG ට්‍රාන්ස්ජීනය භාවිතයෙන් පමණක් අනාවරණය කර ගත හැකි බැවින් Pep2 පොස්පරීකරණය කලින් විස්තර කර නොමැත. Pep1 පොස්පරීකරණය අහෝසි කළ m1A විකෘතිය, ප්ලාන්ටා හි RGA ක්‍රියාකාරිත්වය තරමක් අඩු කළද, RGA ක්‍රියාකාරිත්වය අඩු කිරීමේදී m2A සමඟ ඒකාබද්ධ වූ විට එය ආකලන බලපෑමක් ඇති කළේය (පරිපූරක රූපය 6). වැදගත් වන්නේ, ga1 හා සසඳන විට GA-වැඩිදියුණු කළ sly1 විකෘතියේ Pep1 පොස්පරීකරණය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු වූ අතර, GA RGA ඩිෆොස්ෆොරයිලේෂන් ප්‍රවර්ධනය කරන බවත්, එහි ක්‍රියාකාරිත්වය අඩු කරන බවත් යෝජනා කරයි. GA RGA පොස්පරීකරණය මර්දනය කරන යාන්ත්‍රණයට වැඩිදුර විමර්ශනයක් අවශ්‍ය වේ. එක් හැකියාවක් නම්, හඳුනා නොගත් ප්‍රෝටීන් කයිනේස් නියාමනය හරහා මෙය සාක්ෂාත් කර ගැනීමයි. CK1 ප්‍රෝටීන් කයිනාස් EL1 හි ප්‍රකාශනය සහල්41 හි GA මගින් අඩු කරන බව අධ්‍යයනවලින් පෙන්වා දී ඇතත්, අපගේ ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී යන්නේ Arabidopsis EL1 සමජාතීයතාවයේ (AEL1-4) ඉහළ අනුපිළිවෙලින් විකෘති වීම RGA පොස්පරීකරණය අඩු නොකරන බවයි. අපගේ ප්‍රතිඵල සමඟ එකඟ වෙමින්, Arabidopsis AEL අධික ලෙස ප්‍රකාශ කිරීමේ රේඛා සහ ael ත්‍රිත්ව විකෘතියක් භාවිතා කරමින් මෑතකදී කරන ලද පොස්පරීකරණය කරන ලද අධ්‍යයනයකින් මෙම කයිනාස් වල උපස්ථර ලෙස කිසිදු DELLA ප්‍රෝටීන හඳුනාගෙන නොමැත56. අපි අත්පිටපත සකස් කරන විට, තිරිඟු වල GSK3/SHAGGY වැනි කයිනාස් කේතනය කරන ජානය වන GSK3, DELLA (Rht-B1b)57 පොස්පරීකරණය කළ හැකි බව වාර්තා විය, නමුත් GSK3 මගින් Rht-B1b හි පොස්පරීකරණය ප්ලාන්ටා හි තහවුරු කර නොමැත. ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂමිතික විශ්ලේෂණයෙන් පසුව GSK3 ඉදිරියේ ඇති විට්‍රෝ එන්සයිම ප්‍රතික්‍රියා මගින් Rht-B1b හි DELLA සහ GRAS වසම් අතර පිහිටා ඇති පොස්පරීකරණ ස්ථාන තුනක් අනාවරණය විය (පරිපූරක රූපය 3). පොස්පරීකරණ ස්ථාන තුනෙහිම සෙරීන් සිට ඇලනීන් ආදේශන හේතුවෙන් ට්‍රාන්ස්ජෙනික් තිරිඟු වල Rht-B1b ක්‍රියාකාරිත්වය අඩු වූ අතර, Pep2 RGA හි ඇලනීන් ආදේශන RGA ක්‍රියාකාරිත්වය අඩු කළ බවට අපගේ සොයාගැනීම් වලට අනුකූල විය. කෙසේ වෙතත්, ඉන් විට්‍රෝ ප්‍රෝටීන් හායනය පිළිබඳ පරීක්ෂණ මගින් තවදුරටත් පෙන්නුම් කළේ පොස්පරීකරණය Rht-B1b57 ස්ථාවර කළ හැකි බවයි. මෙය Pep2 RGA හි ඇලනීන් ආදේශන ප්ලාන්ටා හි එහි ස්ථායිතාව වෙනස් නොකරන බව පෙන්වන අපගේ ප්‍රතිඵලවලට වෙනස් ය. තිරිඟු වල GSK3 යනු Arabidopsis 57 හි බ්‍රැසිනොස්ටෙරොයිඩ්-සංවේදී නොවන ප්‍රෝටීන් 2 (BIN2) හි විකලාංගයකි. BIN2 යනු BR සංඥාකරණයේ සෘණ නියාමකයෙකු වන අතර, BR එහි සංඥා මාර්ගය Arabidopsis හි සෘණ නියාමකයෙකු වන අතර BR එහි සංඥා මාර්ගය සක්‍රීය කරයි 58. BR ප්‍රතිකාරය Arabidopsis හි RGA ස්ථායිතාව 59 හෝ පොස්පරීකරණ මට්ටම් අඩු නොකරන බව අපි පෙන්වා දුන්නෙමු (පරිපූරක රූපය 2), එයින් යෝජනා කරන්නේ RGA BIN2 මගින් පොස්පරීකරණය වීමට ඉඩක් නොමැති බවයි.
සියලුම ප්‍රමාණාත්මක දත්ත එක්සෙල් භාවිතයෙන් සංඛ්‍යානමය වශයෙන් විශ්ලේෂණය කරන ලද අතර, ශිෂ්‍යයාගේ ටී-පරීක්ෂණය භාවිතයෙන් සැලකිය යුතු වෙනස්කම් තීරණය කරන ලදී. නියැදි ප්‍රමාණය පූර්ව තීරණය කිරීම සඳහා සංඛ්‍යානමය ක්‍රම භාවිතා කර නොමැත. විශ්ලේෂණයෙන් කිසිදු දත්තයක් බැහැර කර නොමැත; අත්හදා බැලීම අහඹු ලෙස සිදු කර නොමැත; සහ අත්හදා බැලීම සහ ප්‍රතිඵල තක්සේරුව අතරතුර පර්යේෂකයන් වෙන් කිරීම පිළිබඳව දැන සිටියහ. රූප පුරාවෘත්තවල සහ අමු දත්ත ගොනුවල සාම්පල ප්‍රමාණයන් සපයා ඇත.
පළ කළ කාලය: 2025 අප්‍රේල්-15