මදුරුවන්ට එරෙහිව පරිසර හිතකාමී කීට නාශකයක් ලෙස ගෝවා බීජ කුඩු සහ එහි සංයෝගවල ජීව විද්‍යාත්මක ක්‍රියාකාරිත්වය

ඵලදායී ලෙසමදුරුවන් පාලනය කිරීමසහ ඒවා මගින් ගෙන යන රෝග ඇතිවීම අවම කිරීම සඳහා, රසායනික පළිබෝධනාශක සඳහා උපායමාර්ගික, තිරසාර සහ පරිසර හිතකාමී විකල්ප අවශ්‍ය වේ. ඊජිප්තු ඒඩිස් පාලනය සඳහා භාවිතා කිරීම සඳහා ජීව විද්‍යාත්මකව අක්‍රිය ග්ලූකෝසිනොලේට් වල එන්සයිම ජල විච්ඡේදනය මගින් නිපදවන ශාක ව්‍යුත්පන්න අයිසෝතියෝසයනේට් ප්‍රභවයක් ලෙස අපි ඇතැම් බ්‍රැසිකේසී (බ්‍රැසිකා පවුල) වෙතින් බීජ ආහාර ඇගයීමට ලක් කළෙමු (L., 1762). පස්-මේද රහිත බීජ ආහාර වේලක් (Brassica juncea (L) Czern., 1859, Lepidium sativum L., 1753, Sinapis alba L., 1753, Thlaspi arvense L., 1753 සහ Thlaspi arvense - තාප අක්‍රියකරණය සහ එන්සයිම හායනය සඳහා ප්‍රධාන වර්ග තුනක් රසායනික නිෂ්පාදන පැය 24 ක නිරාවරණයකදී allyl isothiocyanate, benzyl isothiocyanate සහ 4-hydroxybenzylisothiocyanate වල Aedes aegypti කීටයන්ට විෂ වීම (LC50) තීරණය කිරීම = 0.04 g/120 ml dH2O). අබ, සුදු අබ සහ අශ්ව වලිගය සඳහා LC50 අගයන්. බීජ ආහාර වේලෙහි allyl isothiocyanate (LC50 = 19.35 ppm) සහ 4 හා සසඳන විට පිළිවෙලින් 0.05, 0.08 සහ 0.05 විය. -Hydroxybenzylisothiocyanate (LC50 = 55.41 ppm) ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පැය 24 කට පසු කීටයන්ට 0.1 g/120 ml dH2O ට වඩා විෂ සහිත විය. මෙම ප්‍රතිඵල ඇල්ෆල්ෆා බීජ ආහාර නිෂ්පාදනයට අනුකූල වේ. බෙන්සයිල් එස්ටරවල ඉහළ කාර්යක්ෂමතාව ගණනය කරන ලද LC50 අගයන්ට අනුරූප වේ. බීජ ආහාර වේල භාවිතා කිරීමෙන් මදුරු පාලනය සඳහා ඵලදායී ක්‍රමයක් සැපයිය හැකිය. කුරුස බීජ කුඩු සහ මදුරු කීටයන්ට එරෙහිව එහි ප්‍රධාන රසායනික සංරචකවල කාර්යක්ෂමතාව සහ කුරුස බීජ කුඩු වල ඇති ස්වාභාවික සංයෝග මදුරු පාලනය සඳහා පොරොන්දු වූ පරිසර හිතකාමී කීට නාශකයක් ලෙස සේවය කළ හැකි ආකාරය පෙන්නුම් කරයි.
ඒඩිස් මදුරුවන් නිසා ඇතිවන වාහක මගින් බෝවන රෝග ප්‍රධාන ගෝලීය මහජන සෞඛ්‍ය ගැටලුවක් ලෙස පවතී. මදුරුවන්ගෙන් බෝවන රෝග ඇතිවීම භූගෝලීය වශයෙන් 1,2,3 පැතිර යන අතර නැවත මතුවන අතර එය දරුණු රෝග පැතිරීමට හේතු වේ4,5,6,7. මිනිසුන් සහ සතුන් අතර රෝග පැතිරීම (උදා: චිකුන්ගුන්යා, ඩෙංගු, රිෆ්ට් නිම්න උණ, කහ උණ ​​සහ සිකා වෛරසය) පෙර නොවූ විරූ ය. ඩෙංගු උණ පමණක් නිවර්තන කලාපයේ බිලියන 3.6 ක් පමණ ජනතාව ආසාදනය වීමේ අවදානමට ලක් කරයි, වාර්ෂිකව ආසාදන මිලියන 390 ක් සිදුවන බවට ඇස්තමේන්තු කර ඇති අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස වසරකට 6,100–24,300 ක් මිය යයි8. දකුණු ඇමරිකාවේ සිකා වෛරසය නැවත මතුවීම සහ පැතිරීම ආසාදිත කාන්තාවන්ට උපදින දරුවන්ගේ මොළයේ හානිය හේතුවෙන් ලොව පුරා අවධානය දිනාගෙන ඇත2. ක්‍රෙමර් සහ තවත් අය අනාවැකි පළ කරන්නේ ඒඩිස් මදුරුවන්ගේ භූගෝලීය පරාසය අඛණ්ඩව පුළුල් වන බවත් 2050 වන විට ලෝක ජනගහනයෙන් අඩක් මදුරුවන්ගෙන් බෝවන ආර්බෝ වයිරස මගින් ආසාදනය වීමේ අවදානමට ලක්වන බවත්ය.
ඩෙංගු සහ කහ උණට එරෙහිව මෑතකදී සංවර්ධනය කරන ලද එන්නත් හැරුණු විට, බොහෝ මදුරුවන්ගෙන් බෝවන රෝග සඳහා එන්නත් තවමත් සංවර්ධනය කර නොමැත9,10,11. එන්නත් තවමත් සීමිත ප්‍රමාණවලින් ලබා ගත හැකි අතර සායනික අත්හදා බැලීම් වලදී පමණක් භාවිතා වේ. කෘතිම කෘමිනාශක භාවිතයෙන් මදුරු වාහකයන් පාලනය කිරීම මදුරුවන්ගෙන් බෝවන රෝග පැතිරීම පාලනය කිරීම සඳහා ප්‍රධාන උපාය මාර්ගයක් වී ඇත12,13. කෘතිම පළිබෝධනාශක මදුරුවන් මරා දැමීමේදී ඵලදායී වුවද, කෘතිම පළිබෝධනාශක අඛණ්ඩව භාවිතා කිරීම ඉලක්කගත නොවන ජීවීන්ට අහිතකර ලෙස බලපාන අතර පරිසරය දූෂණය කරයි14,15,16. ඊටත් වඩා භයානක වන්නේ රසායනික කෘමිනාශක සඳහා මදුරු ප්‍රතිරෝධය වැඩි කිරීමේ ප්‍රවණතාවය17,18,19. පළිබෝධනාශක හා සම්බන්ධ මෙම ගැටළු රෝග වාහකයන් පාලනය කිරීම සඳහා ඵලදායී සහ පරිසර හිතකාමී විකල්ප සෙවීම වේගවත් කර ඇත.
පළිබෝධ පාලනය සඳහා ශාක පළිබෝධනාශක ප්‍රභවයන් ලෙස විවිධ ශාක සංවර්ධනය කර ඇත20,21. ශාක ද්‍රව්‍ය සාමාන්‍යයෙන් පරිසර හිතකාමී වන්නේ ඒවා ජෛව හායනයට ලක්විය හැකි අතර ක්ෂීරපායින්, මාළු සහ උභයජීවීන් වැනි ඉලක්කගත නොවන ජීවීන්ට අඩු හෝ නොසැලකිය හැකි විෂ සහිත බැවිනි20,22. ශාකසාර සූදානම මදුරුවන්ගේ විවිධ ජීවන අවධීන් ඵලදායී ලෙස පාලනය කිරීම සඳහා විවිධ ක්‍රියාකාරී යාන්ත්‍රණ සහිත විවිධ ජෛව ක්‍රියාකාරී සංයෝග නිපදවන බව දන්නා කරුණකි23,24,25,26. අත්‍යවශ්‍ය තෙල් සහ අනෙකුත් ක්‍රියාකාරී ශාක අමුද්‍රව්‍ය වැනි ශාක වලින් ලබාගත් සංයෝග අවධානය දිනාගෙන ඇති අතර මදුරු වාහකයන් පාලනය කිරීම සඳහා නව්‍ය මෙවලම් සඳහා මග පෑදී ඇත. අත්‍යවශ්‍ය තෙල්, මොනොටර්පීන් සහ සෙස්ක්විටර්පීන් විකර්ෂක, පෝෂණ නිෂේධක සහ ඩිම්බකෝෂක ලෙස ක්‍රියා කරයි27,28,29,30,31,32,33. බොහෝ එළවළු තෙල් මදුරු කීටයන්, රූකඩ සහ වැඩිහිටියන්ගේ මරණයට හේතු වන අතර34,35,36, කෘමීන්ගේ ස්නායු, ශ්වසන, අන්තරාසර්ග සහ අනෙකුත් වැදගත් පද්ධති වලට බලපායි37.
මෑත කාලීන අධ්‍යයනයන් මගින් අබ ශාක සහ ඒවායේ බීජ ජෛව ක්‍රියාකාරී සංයෝගවල ප්‍රභවයක් ලෙස භාවිතා කිරීමේ විභවය පිළිබඳ අවබෝධයක් ලබා දී ඇත. අබ ඇට පිටි ජෛව ධූමකාරකයක් ලෙස පරීක්ෂා කර ඇත38,39,40,41 සහ වල් පැලෑටි මර්දනය සඳහා පස සංශෝධනයක් ලෙස භාවිතා කර ඇත42,43,44 සහ පසෙන් බෝවන ශාක රෝග කාරක පාලනය45,46,47,48,49,50, ශාක පෝෂණය. නෙමටෝඩාවන් 41,51, 52, 53, 54 සහ පළිබෝධකයන් 55, 56, 57, 58, 59, 60. මෙම බීජ කුඩු වල දිලීර නාශක ක්‍රියාකාරිත්වය අයිසෝතියෝසයනේට් ලෙස හඳුන්වන ශාක ආරක්ෂිත සංයෝගවලට ආරෝපණය කර ඇත38,42,60. ශාකවල, මෙම ආරක්ෂිත සංයෝග ජෛව ක්‍රියාකාරී නොවන ග්ලූකෝසිනොලේට් ආකාරයෙන් ශාක සෛල තුළ ගබඩා කර ඇත. කෙසේ වෙතත්, කෘමීන් පෝෂණය කිරීමෙන් හෝ රෝග කාරක ආසාදනයකින් ශාක වලට හානි වූ විට, ග්ලූකෝසිනොලේට් මයිරොසිනේස් මගින් ජෛව ක්‍රියාකාරී අයිසෝතියෝසයනේට් බවට ජල විච්ඡේදනය කරනු ලැබේ55,61. අයිසෝතියෝසයනේට් යනු පුළුල් වර්ණාවලී ක්ෂුද්‍ර ජීවී සහ කෘමිනාශක ක්‍රියාකාරකම් ඇති බව දන්නා වාෂ්පශීලී සංයෝග වන අතර, ඒවායේ ව්‍යුහය, ජීව විද්‍යාත්මක ක්‍රියාකාරකම් සහ අන්තර්ගතය බ්‍රැසිකේසී විශේෂ අතර පුළුල් ලෙස වෙනස් වේ42,59,62,63.
අබ ඇට පිටිවලින් ලබාගත් අයිසෝතියෝසයනේට් කෘමිනාශක ක්‍රියාකාරකම් ඇති බව දන්නා නමුත්, වෛද්‍යමය වශයෙන් වැදගත් ආත්‍රපෝඩා වාහකයන්ට එරෙහිව ජීව විද්‍යාත්මක ක්‍රියාකාරකම් පිළිබඳ දත්ත නොමැත. අපගේ අධ්‍යයනය මගින් ඒඩීස් මදුරුවන්ට එරෙහිව මේදය ඉවත් කළ බීජ කුඩු හතරක කීට නාශක ක්‍රියාකාරිත්වය පරීක්ෂා කරන ලදී. ඒඩීස් ඊජිප්ටි කීටයන්. අධ්‍යයනයේ අරමුණ වූයේ මදුරු පාලනය සඳහා පරිසර හිතකාමී ජෛව පළිබෝධනාශක ලෙස ඒවායේ විභව භාවිතය ඇගයීමයි. බීජ පිටි වල ප්‍රධාන රසායනික සංරචක තුනක් වන ඇලිල් අයිසෝතියෝසයනේට් (AITC), බෙන්සයිල් අයිසෝතියෝසයනේට් (BITC) සහ 4-හයිඩ්‍රොක්සිබෙන්සයිලිසෝතියෝසයනේට් (4-HBITC) ද මදුරු කීටයන් මත මෙම රසායනික සංරචකවල ජීව විද්‍යාත්මක ක්‍රියාකාරිත්වය පරීක්ෂා කිරීම සඳහා පරීක්ෂා කරන ලදී. මදුරු කීටයන්ට එරෙහිව ගෝවා බීජ කුඩු හතරක සහ ඒවායේ ප්‍රධාන රසායනික සංරචකවල කාර්යක්ෂමතාව ඇගයීමට ලක් කළ පළමු වාර්තාව මෙයයි.
ඒඩිස් ඊජිප්ටයි (රොක්ෆෙලර් වික්‍රියාව) හි රසායනාගාර ජනපද 26°C, සාපේක්ෂ ආර්ද්‍රතාවය 70% (RH) සහ පැය 10:14 (L:D ප්‍රකාශ කාලපරිච්ඡේදය) පවත්වා ගන්නා ලදී. සංසර්ගයේ යෙදුණු ගැහැණු සතුන් ප්ලාස්ටික් කූඩුවල (උස 11 සෙ.මී. සහ විෂ්කම්භය 9.5 සෙ.මී.) තබා ඇති අතර සිට්‍රේටඩ් ගව රුධිරය (HemoStat Laboratories Inc., Dixon, CA, USA) භාවිතා කරමින් බෝතල් පෝෂණ පද්ධතියක් හරහා පෝෂණය කරන ලදී. රුධිර පෝෂණය සාමාන්‍ය පරිදි 37°C උෂ්ණත්ව පාලනයක් සහිත සංසරණ ජල නාන නලයකට (HAAKE S7, Thermo-Scientific, Waltham, MA, USA) සම්බන්ධ කර ඇති පටල බහු-වීදුරු පෝෂකයක් (Chemglass, Life Sciences LLC, Vineland, NJ, USA) භාවිතා කර සිදු කරන ලදී. සෑම වීදුරු පෝෂක කුටියකම (ප්‍රදේශය 154 mm2) පතුලට පැරෆිල්ම් M පටලයක් දිගු කරන්න. ඉන්පසු සෑම පෝෂකයක්ම සංසර්ගයේ යෙදෙන ගැහැණු සතා අඩංගු කූඩුව ආවරණය කරන ඉහළ ජාලකය මත තබා ඇත. පාස්චර් පයිප්පයක් (ෆිෂර්බ්‍රෑන්ඩ්, ෆිෂර් සයන්ටිෆික්, වෝල්තම්, එම්ඒ, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) භාවිතයෙන් වීදුරු පෝෂක පුනීලයකට ගව රුධිරය ආසන්න වශයෙන් 350–400 μl එකතු කරන ලද අතර වැඩිහිටි පණුවන්ට අවම වශයෙන් පැයක්වත් ජලය බැස යාමට ඉඩ දෙන ලදී. ඉන්පසු ගර්භනී කාන්තාවන්ට 10% සුක්‍රෝස් ද්‍රාවණයක් ලබා දී තනි අතිශය පැහැදිලි සවුෆල් කෝප්ප (1.25 fl oz ප්‍රමාණය, ඩාර්ට් කන්ටේනර් කෝපරේෂන්, මේසන්, එම්අයි, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) තුළ ආවරණය කර ඇති තෙතමනය සහිත පෙරහන් කඩදාසි මත බිත්තර දැමීමට ඉඩ දෙන ලදී. බිත්තර අඩංගු පෙරහන් කඩදාසි මුද්‍රා තැබූ බෑගයක (SC Johnsons, Racine, WI) තබා 26°C දී ගබඩා කරන්න. බිත්තර පැටවුන් බිහි කරන ලද අතර කීටයන් ආසන්න වශයෙන් 200–250 ක් හාවා චව් (ZuPreem, Premium Natural Products, Inc., Mission, KS, USA) සහ අක්මා කුඩු (MP Biomedicals, LLC, Solon, OH, USA) මිශ්‍රණයක් අඩංගු ප්ලාස්ටික් තැටිවල ඇති කරන ලදී. සහ මාළු ෆිලට් (TetraMin, Tetra GMPH, Meer, Germany) 2:1:1 අනුපාතයකින්. අපගේ ජෛව විශ්ලේෂණයන්හිදී ප්‍රමාද වූ තුන්වන අවධියේ කීටයන් භාවිතා කරන ලදී.
මෙම අධ්‍යයනයේදී භාවිතා කරන ලද ශාක බීජ ද්‍රව්‍ය පහත සඳහන් වාණිජ සහ රජයේ ප්‍රභවයන්ගෙන් ලබා ගන්නා ලදී: ඇමරිකා එක්සත් ජනපදයේ වොෂින්ටන් ප්‍රාන්තයේ පැසිෆික් වයඹදිග ගොවි සමුපකාරයෙන් බ්‍රැසිකා ජුන්සියා (දුඹුරු අබ-පැසිෆික් රන්) සහ බ්‍රැසිකා ජුන්සියා (සුදු අබ-ඉඩා රන්); ඇමරිකා එක්සත් ජනපදයේ ඉලිනොයිස් හි පියෝරියා හි කෙලී සීඩ් සහ හාඩ්වෙයාර් සමාගමෙන් (ගාර්ඩන් ක්‍රෙස්) සහ ඇමරිකා එක්සත් ජනපදයේ ඉලිනොයිස් හි පියෝරියා හි USDA-ARS වෙතින් Thlaspi arvense (Field Pennycress-Elisabeth); අධ්‍යයනයේදී භාවිතා කරන ලද කිසිදු බීජයක් පළිබෝධනාශක සමඟ ප්‍රතිකාර කර නොමැත. මෙම අධ්‍යයනයේදී සියලුම බීජ ද්‍රව්‍ය දේශීය හා ජාතික රෙගුලාසිවලට අනුකූලව සහ අදාළ සියලුම දේශීය රාජ්‍ය සහ ජාතික රෙගුලාසිවලට අනුකූලව සකස් කර භාවිතා කරන ලදී. මෙම අධ්‍යයනය මගින් ජානමය ශාක ප්‍රභේද පරීක්ෂා නොකළේය.
බ්‍රැසිකා ජුන්සියා (PG), ඇල්ෆල්ෆා (Ls), සුදු අබ (IG), ත්ලස්පි ආර්වෙන්ස් (DFP) බීජ 0.75 mm දැලක් සහ මල නොබැඳෙන වානේ රෝටරයක්, දත් 12 ක්, 10,000 rpm (වගුව 1) සහිත Retsch ZM200 අල්ට්‍රා කේන්ද්‍රාපසාරී මෝලක් (Retsch, Haan, ජර්මනිය) භාවිතයෙන් සිහින් කුඩු බවට අඹරන ලදී. බිම් බීජ කුඩු කඩදාසි තුණ්ඩයකට මාරු කර පැය 24 ක් සොක්ස්ලෙට් උපකරණයක හෙක්සේන් සමඟ මේදය ඉවත් කරන ලදී. මයිරොසිනේස් ඉවත් කිරීමට සහ ජීව විද්‍යාත්මකව ක්‍රියාකාරී අයිසෝතියෝසයනේට් සෑදීමට ග්ලූකෝසිනොලේට් වල ජල විච්ඡේදනය වැළැක්වීම සඳහා පැය 1 ක් සඳහා මේදය ඉවත් කරන ලද ක්ෂේත්‍ර අබ උප නියැදියක් 100 °C දී තාප පිරියම් කරන ලදී. තාප පිරියම් කරන ලද අශ්ව වලිග බීජ කුඩු (DFP-HT) මයිරොසිනේස් ඉවත් කිරීමෙන් සෘණ පාලනයක් ලෙස භාවිතා කරන ලදී.
කලින් ප්‍රකාශයට පත් කරන ලද ප්‍රොටෝකෝලයකට අනුව, ඉහළ කාර්යසාධනයක් සහිත ද්‍රව වර්ණදේහ (HPLC) භාවිතයෙන් මේදය ඉවත් කළ බීජ ආහාරයේ ග්ලූකෝසිනොලේට් අන්තර්ගතය ත්‍රිත්ව වශයෙන් තීරණය කරන ලදී. කෙටියෙන් කිවහොත්, මේදය ඉවත් කළ බීජ කුඩු මිලිග්‍රෑම් 250 ක සාම්පලයකට මෙතනෝල් මිලි ලීටර් 3 ක් එකතු කරන ලදී. සෑම සාම්පලයක්ම මිනිත්තු 30 ක් ජල ස්නානයක ශබ්ද කරන ලද අතර පැය 16 ක් 23°C දී අඳුරේ තබන ලදී. ඉන්පසු කාබනික ස්ථරයේ මිලි ලීටර් 1 ක කොටසක් 0.45 μm පෙරහනක් හරහා ස්වයංක්‍රීය සාම්පලයකට පෙරන ලදී. ෂිමාඩ්සු HPLC පද්ධතියක් (LC 20AD පොම්ප දෙකක්; SIL 20A ස්වයංක්‍රීය සාම්පල; DGU 20As degasser; 237 nm හි නිරීක්ෂණය සඳහා SPD-20A UV-VIS අනාවරකය; සහ CBM-20A සන්නිවේදන බස් මොඩියුලය) මත ක්‍රියාත්මක වන අතර, බීජ ආහාරයේ ග්ලූකෝසිනොලේට් අන්තර්ගතය ත්‍රිත්ව වශයෙන් තීරණය කරන ලදී. Shimadzu LC Solution මෘදුකාංග අනුවාදය 1.25 (Shimadzu Corporation, Columbia, MD, USA) භාවිතා කරමින්. තීරුව C18 Inertsil ප්‍රතිලෝම අවධි තීරුවක් විය (250 mm × 4.6 mm; RP C-18, ODS-3, 5u; GL Sciences, Torrance, CA, USA). ආරම්භක ජංගම අවධි තත්වයන් ජලයේ 12% මෙතනෝල්/88% 0.01 M ටෙට්‍රාබියුටිලමෝනියම් හයිඩ්‍රොක්සයිඩ් (TBAH; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ලෙස සකසා ඇති අතර එහි ප්‍රවාහ අනුපාතය 1 mL/min වේ. සාම්පලයේ 15 μl එන්නත් කිරීමෙන් පසු, ආරම්භක කොන්දේසි මිනිත්තු 20 ක් පවත්වා ගෙන යන ලද අතර, පසුව ද්‍රාවක අනුපාතය 100% මෙතනෝල් ලෙස සකස් කරන ලද අතර, මුළු සාම්පල විශ්ලේෂණ කාලය මිනිත්තු 65 කි. නැවුම්ව සකස් කරන ලද සයිනපයින්, ග්ලූකොසිනොලේට් සහ මයිරොසින් ප්‍රමිතීන් (සිග්මා-ඇල්ඩ්‍රිච්, ශාන්ත ලුවී, MO, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) අනුක්‍රමික තනුක කිරීමෙන් සම්මත වක්‍රයක් (nM/mAb මත පදනම් වූ) ජනනය කරන ලදී. මේද ඉවත් කළ බීජ ආහාරයේ සල්ෆර් අන්තර්ගතය ඇස්තමේන්තු කිරීම සඳහා. ග්ලූකොසිනොලේට්. සාම්පලවල ග්ලූකොසිනොලේට් සාන්ද්‍රණය Agilent 1100 HPLC (Agilent, Santa Clara, CA, USA) මත OpenLAB CDS ChemStation අනුවාදය (C.01.07 SR2 [255]) භාවිතයෙන් සහ කලින් විස්තර කරන ලද ක්‍රමයක් භාවිතා කරමින් පරීක්ෂා කරන ලදී. ග්ලූකොසිනොලේට් සාන්ද්‍රණයන් තීරණය කරන ලදී; HPLC පද්ධති අතර සැසඳිය යුතුය.
ඇලිල් අයිසොතියෝසයනේට් (94%, ස්ථායී) සහ බෙන්සයිල් අයිසොතියෝසයනේට් (98%) ෆිෂර් සයන්ටිෆික් (තර්මෝ ෆිෂර් සයන්ටිෆික්, වෝල්තම්, එම්ඒ, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. 4-හයිඩ්‍රොක්සිබෙන්සිලිසෝතියෝසයනේට් කෙම්කෲස් (සැන්ටා කෲස් ජෛව තාක්‍ෂණය, කැලිෆෝනියා, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. මයිරොසිනේස් මගින් එන්සයිමමය වශයෙන් ජල විච්ඡේදනය කළ විට, ග්ලූකෝසිනොලේට්, ග්ලූකෝසිනොලේට් සහ ග්ලූකෝසිනොලේට් පිළිවෙලින් ඇලිල් අයිසොතියෝසයනේට්, බෙන්සයිල් අයිසොතියෝසයනේට් සහ 4-හයිඩ්‍රොක්සිබෙන්සිලිසෝතියෝසයනේට් සාදයි.
මුටුරි සහ තවත් අයගේ ක්‍රමයට අනුව රසායනාගාර ජෛව පරීක්ෂණ සිදු කරන ලදී. 32 වෙනස් කිරීම් සහිතව. අධ්‍යයනයේදී අඩු මේද බීජ ආහාර පහක් භාවිතා කරන ලදී: DFP, DFP-HT, IG, PG සහ Ls. කීටයන් විස්සක් මිලි ලීටර් 400 ක ඉවත දැමිය හැකි ත්‍රි-මාර්ග බීකරයක (VWR International, LLC, Radnor, PA, USA) තැන්පත් කරන ලදී. මදුරු කීට විෂ වීම සඳහා බීජ ආහාර සාන්ද්‍රණයන් හතක් පරීක්ෂා කරන ලදී: DFP බීජ ආහාර වේල සඳහා 0.01, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1 සහ 0.12 g බීජ ආහාර වේල/120 ml dH2O, DFP-HT, IG සහ PG. මූලික ජෛව පරීක්ෂණවලින් පෙනී යන්නේ මේද ඉවත් කළ Ls බීජ පිටි පරීක්ෂා කරන ලද අනෙකුත් බීජ පිටි හතරකට වඩා විෂ සහිත බවයි. එමනිසා, අපි Ls බීජ ආහාරයේ ප්‍රතිකාර සාන්ද්‍රණ හත පහත සාන්ද්‍රණයන්ට සකස් කළෙමු: 0.015, 0.025, 0.035, 0.045, 0.055, 0.065, සහ 0.075 g/120 mL dH2O.
පරීක්ෂණ තත්වයන් යටතේ සාමාන්‍ය කෘමි මරණ අනුපාතය තක්සේරු කිරීම සඳහා ප්‍රතිකාර නොකළ පාලන කණ්ඩායමක් (dH20, බීජ ආහාර අතිරේකයක් නොමැත) ඇතුළත් කරන ලදී. සෑම බීජ ආහාර වේලක් සඳහාම විෂ විද්‍යාත්මක ජෛව විශ්ලේෂණයන්ට අනුපිටපත් තුනේ බෑවුම් බීකර් තුනක් (බීකරයකට ප්‍රමාද වූ තුන්වන ක්ෂණික කීටයන් 20) ඇතුළත් වූ අතර, මුළු කුප්පි 108 ක් සඳහා. ප්‍රතිකාර කරන ලද බහාලුම් කාමර උෂ්ණත්වයේ (20-21°C) ගබඩා කර ඇති අතර ප්‍රතිකාර සාන්ද්‍රණයට අඛණ්ඩව නිරාවරණය වීමෙන් පැය 24 සහ 72 තුළ කීට මරණ සංඛ්‍යාව වාර්තා විය. මදුරුවාගේ ශරීරය සහ උපග්‍රන්ථ තුනී මල නොබැඳෙන වානේ spatula එකකින් සිදුරු කළ විට හෝ ස්පර්ශ කළ විට චලනය නොවන්නේ නම්, මදුරු කීටයන් මිය ගිය බව සැලකේ. මියගිය කීටයන් සාමාන්‍යයෙන් කන්ටේනරයේ පතුලේ හෝ ජල මතුපිට පෘෂ්ඨීය හෝ උදර ස්ථානයක චලනය නොවී පවතී. විවිධ කීට කණ්ඩායම් භාවිතා කරමින් විවිධ දිනවල අත්හදා බැලීම තුන් වතාවක් නැවත නැවතත් කරන ලද අතර, එක් එක් ප්‍රතිකාර සාන්ද්‍රණයට නිරාවරණය වන මුළු කීටයන් 180 ක් සඳහා.
මදුරු කීටයන්ට AITC, BITC සහ 4-HBITC වල විෂ සහිත බව තක්සේරු කරන ලද්දේ එකම ජෛව විශ්ලේෂණ ක්‍රියා පටිපාටිය භාවිතා කර නමුත් විවිධ ප්‍රතිකාර සමඟිනි. 2-mL කේන්ද්‍රාපසාරී නලයක නිරපේක්ෂ එතනෝල් 900 µL වලට රසායනිකයෙන් 100 µL එකතු කර හොඳින් මිශ්‍ර කිරීම සඳහා තත්පර 30 ක් සොලවා එක් එක් රසායනික ද්‍රව්‍ය සඳහා 100,000 ppm තොග විසඳුම් සකස් කරන්න. අපගේ මූලික ජෛව විශ්ලේෂණ මත පදනම්ව ප්‍රතිකාර සාන්ද්‍රණ තීරණය කරන ලද අතර, එමඟින් BITC AITC සහ 4-HBITC වලට වඩා බෙහෙවින් විෂ සහිත බව සොයා ගන්නා ලදී. විෂ වීම තීරණය කිරීම සඳහා, BITC සාන්ද්‍රණ 5 ක් (1, 3, 6, 9 සහ 12 ppm), AITC සාන්ද්‍රණ 7 ක් (5, 10, 15, 20, 25, 30 සහ 35 ppm) සහ 4-HBITC සාන්ද්‍රණ 6 ක් (15, 15, 20, 25, 30 සහ 35 ppm). 30, 45, 60, 75 සහ 90 ppm). පාලන ප්‍රතිකාරය සඳහා නිරපේක්ෂ එතනෝල් 108 μL එන්නත් කරන ලද අතර එය රසායනික ප්‍රතිකාරයේ උපරිම පරිමාවට සමාන වේ. ඉහත පරිදි ජෛව විශ්ලේෂණයන් නැවත නැවතත් සිදු කරන ලද අතර, ප්‍රතිකාර සාන්ද්‍රණයකට කීටයන් 180 ක් නිරාවරණය විය. පැය 24 ක අඛණ්ඩ නිරාවරණයෙන් පසු AITC, BITC සහ 4-HBITC හි සෑම සාන්ද්‍රණයක් සඳහාම කීට මරණ අනුපාතය වාර්තා විය.
50% මාරාන්තික සාන්ද්‍රණය (LC50), 90% මාරාන්තික සාන්ද්‍රණය (LC90), බෑවුම, මාරාන්තික මාත්‍රා සංගුණකය සහ 95% මාරාන්තික සාන්ද්‍රණය ගණනය කිරීම සඳහා පෝලෝ මෘදුකාංගය (Polo Plus, LeOra මෘදුකාංගය, අනුවාදය 1.0) භාවිතයෙන් මාත්‍රාවට අදාළ මරණ දත්ත 65 ක Probit විශ්ලේෂණය සිදු කරන ලදී. ලඝු-පරිවර්තනය කරන ලද සාන්ද්‍රණය සහ මාත්‍රා-මරණ ​​වක්‍ර සඳහා මාරාන්තික මාත්‍රා අනුපාත සඳහා විශ්වාසනීය කාල පරතරයන් මත පදනම්ව. මරණීය දත්ත පදනම් වී ඇත්තේ එක් එක් ප්‍රතිකාර සාන්ද්‍රණයට නිරාවරණය වන කීටයන් 180 ක ඒකාබද්ධ අනුරූ දත්ත මත ය. එක් එක් බීජ ආහාර වේල සහ එක් එක් රසායනික සංරචකය සඳහා සම්භාවිතා විශ්ලේෂණ වෙන වෙනම සිදු කරන ලදී. මාරාන්තික මාත්‍රා අනුපාතයේ 95% විශ්වාසනීය පරතරය මත පදනම්ව, බීජ ආහාර වේලෙහි සහ රසායනික සංඝටක මදුරු කීටයන්ට විෂ වීම සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් ලෙස සලකනු ලැබීය, එබැවින් 1 ක අගයක් අඩංගු විශ්වාසනීය පරතරයක් සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් නොවීය, P = 0.0566.
මේද ඉවත් කළ බීජ පිටි DFP, IG, PG සහ Ls වල ප්‍රධාන ග්ලූකෝසිනොලේට් නිර්ණය කිරීම සඳහා HPLC ප්‍රතිඵල 1 වගුවේ ලැයිස්තුගත කර ඇත. පරීක්ෂා කරන ලද බීජ පිටි වල ප්‍රධාන ග්ලූකෝසිනොලේට් DFP සහ PG හැර වෙනස් වූ අතර, ඒවායේ මයිරොසිනේස් ග්ලූකෝසිනොලේට් අඩංගු විය. PG හි මයිරොසිනින් අන්තර්ගතය DFP වලට වඩා පිළිවෙලින් 33.3 ± 1.5 සහ 26.5 ± 0.9 mg/g විය. Ls බීජ කුඩු වල ග්ලූකෝග්ලිකෝන් 36.6 ± 1.2 mg/g අඩංගු වූ අතර IG බීජ කුඩු වල සයිනපයින් 38.0 ± 0.5 mg/g අඩංගු විය.
Ae හි කීටයන්. මේද ඉවත් කළ බීජ ආහාර සමඟ ප්‍රතිකාර කළ විට Aedes aegypti මදුරුවන් මරා දමන ලදී, නමුත් ප්‍රතිකාරයේ කාර්යක්ෂමතාව ශාක විශේෂ අනුව වෙනස් විය. නිරාවරණයෙන් පැය 24 සහ 72 කට පසු DFP-NT පමණක් මදුරු කීටයන්ට විෂ සහිත නොවීය (වගුව 2). ක්‍රියාකාරී බීජ කුඩු වල විෂ වීම සාන්ද්‍රණය වැඩි වීමත් සමඟ වැඩි විය (රූපය 1A, B). පැය 24 සහ පැය 72 තක්සේරු කිරීම් වලදී LC50 අගයන්හි මාරාන්තික මාත්‍රා අනුපාතයේ 95% CI මත පදනම්ව බීජ ආහාරයෙන් මදුරු කීටයන්ට විෂ වීම සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් විය (වගුව 3). පැය 24 කට පසු, Ls බීජ ආහාරයේ විෂ සහිත බලපෑම අනෙකුත් බීජ ආහාර ප්‍රතිකාරවලට වඩා වැඩි වූ අතර, ඉහළම ක්‍රියාකාරිත්වය සහ කීටයන්ට උපරිම විෂ වීම (LC50 = 0.04 g/120 ml dH2O). IG, Ls සහ PG බීජ කුඩු ප්‍රතිකාර හා සසඳන විට කීටයන් පැය 24 තුළ DFP වලට අඩු සංවේදීතාවයක් දැක්වූ අතර, LC50 අගයන් පිළිවෙලින් 0.115, 0.04 සහ 0.08 g/120 ml dH2O වන අතර ඒවා සංඛ්‍යානමය වශයෙන් LC50 අගයට වඩා ඉහළ අගයක් ගනී. 0.211 g/120 ml dH2O (වගුව 3). DFP, IG, PG සහ Ls වල LC90 අගයන් පිළිවෙලින් 0.376, 0.275, 0.137 සහ 0.074 g/120 ml dH2O විය (වගුව 2). DPP හි ඉහළම සාන්ද්‍රණය 0.12 g/120 ml dH2O විය. තක්සේරු කිරීමෙන් පැය 24 කට පසු, සාමාන්‍ය කීට මරණ අනුපාතය 12% ක් පමණක් වූ අතර, IG සහ PG කීටයන්ගේ සාමාන්‍ය මරණ අනුපාතය පිළිවෙලින් 51% සහ 82% දක්වා ළඟා විය. ඇගයීමෙන් පැය 24 කට පසු, Ls බීජ ආහාර ප්‍රතිකාරයේ ඉහළම සාන්ද්‍රණය (0.075 g/120 ml dH2O) සඳහා සාමාන්‍ය කීට මරණ අනුපාතය 99% කි (රූපය 1A).
මරණ වක්‍ර ඇස්තමේන්තු කරන ලද්දේ Ae. ඊජිප්තු කීටයන්ගේ (3 වන මට්ටමේ කීටයන්) මාත්‍රා ප්‍රතිචාරය (ප්‍රොබිට්) සිට ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පැය 24 (A) සහ පැය 72 (B) ට පසු බීජ ආහාර සාන්ද්‍රණය දක්වා ය. තිත් රේඛාව බීජ ආහාර ප්‍රතිකාරයේ LC50 නියෝජනය කරයි. DFP Thlaspi arvense, DFP-HT තාපය අක්‍රිය කළ Thlaspi arvense, IG Sinapsis alba (Ida Gold), PG Brassica juncea (Pacific Gold), Ls Lepidium sativum.
පැය 72ක ඇගයීමේදී, DFP, IG සහ PG බීජ ආහාර වේලෙහි LC50 අගයන් පිළිවෙලින් 0.111, 0.085 සහ 0.051 g/120 ml dH2O විය. Ls බීජ ආහාර වේලට නිරාවරණය වූ සියලුම කීටයන් පාහේ නිරාවරණයෙන් පැය 72කට පසු මිය ගිය බැවින් මරණ දත්ත Probit විශ්ලේෂණයට අනුකූල නොවීය. අනෙකුත් බීජ ආහාර වේල් හා සසඳන විට, කීටයන් DFP බීජ ආහාර ප්‍රතිකාරයට අඩු සංවේදී වූ අතර සංඛ්‍යානමය වශයෙන් ඉහළ LC50 අගයන් තිබුණි (වගු 2 සහ 3). පැය 72කට පසු, DFP, IG සහ PG බීජ ආහාර ප්‍රතිකාර සඳහා LC50 අගයන් පිළිවෙලින් 0.111, 0.085 සහ 0.05 g/120 ml dH2O ලෙස ඇස්තමේන්තු කර ඇත. පැය 72ක ඇගයීමකින් පසු, DFP, IG සහ PG බීජ කුඩු වල LC90 අගයන් පිළිවෙලින් 0.215, 0.254 සහ 0.138 g/120 ml dH2O විය. පැය 72ක ඇගයීමකින් පසු, 0.12 g/120 ml dH2O උපරිම සාන්ද්‍රණයකින් DFP, IG සහ PG බීජ ආහාර ප්‍රතිකාර සඳහා සාමාන්‍ය කීට මරණ අනුපාතය පිළිවෙලින් 58%, 66% සහ 96% විය (රූපය 1B). පැය 72ක ඇගයීමකින් පසු, PG බීජ ආහාර වේල IG සහ DFP බීජ ආහාර වේලට වඩා විෂ සහිත බව සොයා ගන්නා ලදී.
කෘත්‍රිම අයිසෝතියෝසයනේට්, ඇලයිල් අයිසෝතියෝසයනේට් (AITC), බෙන්සයිල් අයිසෝතියෝසයනේට් (BITC) සහ 4-හයිඩ්‍රොක්සිබෙන්සයිලිසෝතියෝසයනේට් (4-HBITC) මගින් මදුරු කීටයන් ඵලදායී ලෙස මරා දැමිය හැකිය. ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පසු පැය 24 තුළ, BITC කීටයන්ට වඩා විෂ සහිත විය, 5.29 ppm ක LC50 අගයක් AITC සඳහා 19.35 ppm සහ 4-HBITC සඳහා 55.41 ppm (වගුව 4) ට සාපේක්ෂව. AITC සහ BITC හා සසඳන විට, 4-HBITC අඩු විෂ සහිත බවක් සහ ඉහළ LC50 අගයක් ඇත. වඩාත්ම ප්‍රබල බීජ ආහාර වේලෙහි ප්‍රධාන අයිසෝතියෝසයනේට් දෙකෙහි (Ls සහ PG) මදුරු කීට විෂ සහිත බවෙහි සැලකිය යුතු වෙනස්කම් තිබේ. AITC, BITC සහ 4-HBITC අතර LC50 අගයන්හි මාරාන්තික මාත්‍රා අනුපාතය මත පදනම් වූ විෂ වීම සංඛ්‍යානමය වෙනසක් පෙන්නුම් කළ අතර එමඟින් LC50 මාරාන්තික මාත්‍රා අනුපාතයේ 95% CI හි 1 අගයක් ඇතුළත් නොවීය (P = 0.05, වගුව 4). BITC සහ AITC යන දෙකෙහිම ඉහළම සාන්ද්‍රණයන් පරීක්ෂා කරන ලද කීටයන්ගෙන් 100% ක් මරා දමන බවට ඇස්තමේන්තු කර ඇත (රූපය 2).
Ae හි මාත්‍රා ප්‍රතිචාරයෙන් (Probit) මරණ වක්‍ර ඇස්තමේන්තු කරන ලදී. ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පැය 24 කට පසු, ඊජිප්තු කීටයන් (3 වන මට්ටමේ කීටයන්) කෘතිම අයිසෝතියෝසයනේට් සාන්ද්‍රණයට ළඟා විය. තිත් රේඛාව අයිසෝතියෝසයනේට් ප්‍රතිකාර සඳහා LC50 නියෝජනය කරයි. බෙන්සයිල් අයිසෝතියෝසයනේට් BITC, ඇලයිල් අයිසෝතියෝසයනේට් AITC සහ 4-HBITC.
මදුරු වාහක පාලන කාරක ලෙස ශාක ජෛව පළිබෝධනාශක භාවිතය දිගු කලක් තිස්සේ අධ්‍යයනය කර ඇත. බොහෝ ශාක කෘමිනාශක ක්‍රියාකාරකම් ඇති ස්වභාවික රසායනික ද්‍රව්‍ය නිපදවයි37. ඒවායේ ජෛව ක්‍රියාකාරී සංයෝග මදුරුවන් ඇතුළු පළිබෝධ පාලනය කිරීමේ විශාල විභවයක් සහිත කෘතිම කෘමිනාශක සඳහා ආකර්ශනීය විකල්පයක් සපයයි.
අබ පැල ඔවුන්ගේ බීජ සඳහා බෝගයක් ලෙස වගා කරනු ලබන අතර, කුළුබඩුවක් සහ තෙල් ප්‍රභවයක් ලෙස භාවිතා කරයි. බීජ වලින් අබ තෙල් නිස්සාරණය කරන විට හෝ ජෛව ඉන්ධන ලෙස භාවිතා කිරීම සඳහා අබ නිස්සාරණය කරන විට, [69] අතුරු ඵලය වන්නේ මේද රහිත බීජ ආහාර වේලයි. මෙම බීජ ආහාර වේලෙහි එහි ස්වාභාවික ජෛව රසායනික සංරචක සහ ජල විච්ඡේදක එන්සයිම බොහොමයක් රඳවා ගනී. මෙම බීජ ආහාරයේ විෂ සහිත බව අයිසෝතියෝසයනේට් නිෂ්පාදනයට හේතු වේ55,60,61. බීජ ආහාර වේල සජලනය කිරීමේදී මයිරොසිනේස් එන්සයිම මගින් ග්ලූකෝසිනොලේට් ජල විච්ඡේදනය කිරීමෙන් අයිසෝතියෝසයනේට් සෑදී ඇති අතර දිලීර නාශක, බැක්ටීරියා නාශක, නෙමැටිසයිඩල් සහ කෘමිනාශක බලපෑම් මෙන්ම රසායනික සංවේදක බලපෑම් සහ රසායනික චිකිත්සක ගුණාංග ඇතුළු අනෙකුත් ගුණාංග ඇති බව දන්නා කරුණකි61,62,70. අබ ශාක සහ බීජ ආහාර පස සහ ගබඩා කළ ආහාර පළිබෝධකයන්ට එරෙහිව ධූමකාරක ලෙස ඵලදායී ලෙස ක්‍රියා කරන බව අධ්‍යයන කිහිපයක් පෙන්වා දී ඇත57,59,71,72. මෙම අධ්‍යයනයේ දී, අපි බීජ හතරක ආහාර වේලෙහි සහ එහි ජෛව ක්‍රියාකාරී නිෂ්පාදන තුන වන AITC, BITC සහ 4-HBITC වල Aedes මදුරු කීටයන්ට ඇති විෂ සහිත බව තක්සේරු කළෙමු. Aedes aegypti. මදුරු කීටයන් අඩංගු ජලයට බීජ ආහාර සෘජුවම එකතු කිරීමෙන් මදුරු කීටයන්ට විෂ සහිත අයිසෝතියෝසයනේට් නිපදවන එන්සයිම ක්‍රියාවලීන් සක්‍රීය වනු ඇතැයි අපේක්ෂා කෙරේ. වාමන අබ ඇට ආහාර වේල භාවිතයට පෙර තාප පිරියම් කළ විට බීජ ආහාරයේ නිරීක්ෂණය කරන ලද කීට නාශක ක්‍රියාකාරිත්වය සහ කෘමිනාශක ක්‍රියාකාරකම් නැතිවීම මගින් මෙම ජෛව පරිවර්තනය අර්ධ වශයෙන් පෙන්නුම් කරන ලදී. තාප පිරියම් කිරීම ග්ලූකෝසිනොලේට් සක්‍රීය කරන ජල විච්ඡේදක එන්සයිම විනාශ කරනු ඇතැයි අපේක්ෂා කරන අතර එමඟින් ජෛව ක්‍රියාකාරී අයිසෝතියෝසයනේට් සෑදීම වළක්වයි. ජලජ පරිසරයක මදුරුවන්ට එරෙහිව ගෝවා බීජ කුඩු වල කෘමිනාශක ගුණ තහවුරු කරන පළමු අධ්‍යයනය මෙයයි.
පරීක්ෂා කරන ලද බීජ කුඩු අතරින්, වෝටර්ක්‍රෙස් බීජ කුඩු (Ls) වඩාත්ම විෂ සහිත වූ අතර එය Aedes albopictus හි ඉහළ මරණ අනුපාතයට හේතු විය. Aedes aegypti කීටයන් පැය 24 ක් අඛණ්ඩව සකස් කරන ලදී. ඉතිරි බීජ කුඩු තුන (PG, IG සහ DFP) මන්දගාමී ක්‍රියාකාරිත්වයක් ඇති අතර පැය 72 ක අඛණ්ඩ ප්‍රතිකාරයකින් පසුව තවමත් සැලකිය යුතු මරණ සංඛ්‍යාවක් ඇති කළේය. Ls බීජ ආහාරයේ පමණක් සැලකිය යුතු ප්‍රමාණයේ ග්ලූකෝසිනෝලේට් අඩංගු වූ අතර, PG සහ DFP හි මයිරොසිනේස් අඩංගු වූ අතර IG හි ප්‍රධාන ග්ලූකෝසිනෝලේට් ලෙස ග්ලූකෝසිනෝලේට් අඩංගු විය (වගුව 1). ග්ලූකෝට්‍රොපයෝලින් BITC වෙත ජල විච්ඡේදනය කර ඇති අතර සයිනල්බයින් 4-HBITC61,62 දක්වා ජල විච්ඡේදනය කර ඇත. අපගේ ජෛව පරීක්ෂණ ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී යන්නේ Ls බීජ ආහාර සහ කෘතිම BITC යන දෙකම මදුරු කීටයන්ට ඉතා විෂ සහිත බවයි. PG සහ DFP බීජ ආහාරයේ ප්‍රධාන සංරචකය වන්නේ මයිරොසිනේස් ග්ලූකෝසිනෝලේට් වන අතර එය AITC වෙත ජල විච්ඡේදනය කර ඇත. 19.35 ppm ක LC50 අගයක් සහිත මදුරු කීටයන් මරා දැමීමට AITC ඵලදායී වේ. AITC සහ BITC හා සසඳන විට, 4-HBITC අයිසෝතියෝසයනේට් කීටයන්ට අවම විෂ සහිත වේ. AITC BITC ට වඩා අඩු විෂ සහිත වුවද, ඒවායේ LC50 අගයන් මදුරු කීටයන් මත පරීක්ෂා කරන ලද බොහෝ අත්‍යවශ්‍ය තෙල්වලට වඩා අඩුය32,73,74,75.
මදුරු කීටයන්ට එරෙහිව භාවිතා කිරීම සඳහා අපගේ කුරුස බීජ කුඩු වල ප්‍රධාන ග්ලූකෝසිනොලේට් එකක් අඩංගු වන අතර එය HPLC විසින් තීරණය කරන ලද පරිදි මුළු ග්ලූකෝසිනොලේට් වලින් 98-99% කට වඩා වැඩිය. අනෙකුත් ග්ලූකෝසිනොලේට් වල අංශු මාත්‍ර ප්‍රමාණයක් අනාවරණය වූ නමුත් ඒවායේ මට්ටම් මුළු ග්ලූකෝසිනොලේට් වලින් 0.3% ට වඩා අඩු විය. වෝටර්ක්‍රෙස් (L. sativum) බීජ කුඩු වල ද්විතියික ග්ලූකෝසිනොලේට් (sinigrin) අඩංගු වේ, නමුත් ඒවායේ අනුපාතය මුළු ග්ලූකෝසිනොලේට් වලින් 1% ක් වන අතර ඒවායේ අන්තර්ගතය තවමත් නොසැලකිය යුතුය (0.4 mg/g බීජ කුඩු පමණ). PG සහ DFP වල එකම ප්‍රධාන ග්ලූකෝසිනොලේට් (myrosin) අඩංගු වුවද, ඒවායේ බීජ ආහාර වේලෙහි කීට නාශක ක්‍රියාකාරිත්වය ඒවායේ LC50 අගයන් නිසා සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් වේ. කෝණාකාර වලට විෂ වීම වෙනස් වේ. Aedes aegypti කීටයන් මතුවීම බීජ පෝෂක දෙක අතර myrosinase ක්‍රියාකාරිත්වයේ හෝ ස්ථායිතාවයේ වෙනස්කම් නිසා විය හැකිය. බ්‍රැසිකේසි ශාකවල අයිසෝතියෝසයනේට් වැනි ජල විච්ඡේදක නිෂ්පාදනවල ජෛව උපයෝගීතාවයට මයිරොසිනේස් ක්‍රියාකාරිත්වය වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි76. Pocock et al.77 සහ Wilkinson et al.78 විසින් කරන ලද පෙර වාර්තාවලින් පෙන්නුම් කර ඇත්තේ මයිරොසිනේස් ක්‍රියාකාරිත්වයේ සහ ස්ථායිතාවයේ වෙනස්කම් ජානමය සහ පාරිසරික සාධක සමඟ ද සම්බන්ධ විය හැකි බවයි.
අනුරූප රසායනික යෙදීම් සමඟ සංසන්දනය කිරීම සඳහා එක් එක් බීජ ආහාර වේලෙහි LC50 අගයන් මත පදනම්ව පැය 24 සහ 72 (වගුව 5) මත පදනම්ව අපේක්ෂිත ජෛව ක්‍රියාකාරී අයිසෝතියෝසයනේට් අන්තර්ගතය ගණනය කරන ලදී. පැය 24 කට පසු, බීජ ආහාර වේලෙහි ඇති අයිසෝතියෝසයනේට් පිරිසිදු සංයෝගවලට වඩා විෂ සහිත විය. අයිසෝතියෝසයනේට් බීජ ප්‍රතිකාරවල මිලියනයකට කොටස් (ppm) මත පදනම්ව ගණනය කරන ලද LC50 අගයන් BITC, AITC සහ 4-HBITC යෙදුම් සඳහා LC50 අගයන්ට වඩා අඩු විය. බීජ ආහාර පෙති පරිභෝජනය කරන කීටයන් අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු (රූපය 3A). එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස, බීජ ආහාර පෙති ශරීරගත කිරීමෙන් කීටයන්ට විෂ සහිත අයිසෝතියෝසයනේට් වලට වැඩි සාන්ද්‍රිත නිරාවරණයක් ලැබිය හැකිය. පැය 24 නිරාවරණයේදී IG සහ PG බීජ ආහාර ප්‍රතිකාර වලදී මෙය වඩාත් පැහැදිලි විය, එහිදී LC50 සාන්ද්‍රණය පිරිසිදු AITC සහ 4-HBITC ප්‍රතිකාරවලට වඩා පිළිවෙලින් 75% සහ 72% අඩු විය. Ls සහ DFP ප්‍රතිකාර පිරිසිදු අයිසෝතියෝසයනේට් වලට වඩා විෂ සහිත වූ අතර, LC50 අගයන් පිළිවෙලින් 24% සහ 41% කින් අඩු විය. පාලන ප්‍රතිකාරයේ කීටයන් සාර්ථකව රූකඩ බවට පත් විය (රූපය 3B), බීජ ආහාර ප්‍රතිකාරයේ බොහෝ කීටයන් රූකඩ බවට පත් නොවූ අතර කීට වර්ධනය සැලකිය යුතු ලෙස ප්‍රමාද විය (රූපය 3B,D). ස්පොඩොප්ටෙරාලිටුරා හි, අයිසෝතියෝසයනේට් වර්ධන ප්‍රමාදය සහ සංවර්ධන ප්‍රමාදය සමඟ සම්බන්ධ වේ79.
Ae. Aedes aegypti මදුරුවන්ගේ කීටයන් පැය 24-72 අතර කාලයක් Brassica බීජ කුඩු වලට අඛණ්ඩව නිරාවරණය විය. (A) මුඛ කොටස්වල බීජ ආහාර අංශු සහිත මිය ගිය කීටයන් (රවුම් කර ඇත); (B) පාලන ප්‍රතිකාරය (එකතු කළ බීජ ආහාර නොමැතිව dH20) පෙන්නුම් කරන්නේ කීටයන් සාමාන්‍යයෙන් වර්ධනය වී පැය 72 කට පසු රූකඩ බවට පත්වීමට පටන් ගන්නා බවයි (C, D) බීජ ආහාරයෙන් ප්‍රතිකාර කළ කීටයන්; බීජ ආහාරයේ වර්ධනයේ වෙනස්කම් පෙන්නුම් කළ අතර රූකඩ බවට පත් නොවීය.
මදුරු කීටයන්ට අයිසෝතියෝසයනේට් වල විෂ සහිත බලපෑම් යාන්ත්‍රණය අපි අධ්‍යයනය කර නැත. කෙසේ වෙතත්, රතු ගිනි කුහුඹුවන් (සොලෙනොප්සිස් ඉන්වික්ටා) පිළිබඳ පෙර අධ්‍යයනයන් පෙන්වා දී ඇත්තේ ග්ලූටතයෝන් S-ට්‍රාන්ස්ෆෙරේස් (GST) සහ එස්ටරේස් (EST) නිෂේධනය කිරීම අයිසෝතියෝසයනේට් ජෛව ක්‍රියාකාරීත්වයේ ප්‍රධාන යාන්ත්‍රණය බවත්, AITC, අඩු ක්‍රියාකාරිත්වයකදී පවා, GST ක්‍රියාකාරිත්වය ද වළක්වා ගත හැකි බවත්ය. අඩු සාන්ද්‍රණයකින් රතු ආනයනික ගිනි කුහුඹුවන්. මාත්‍රාව 0.5 µg/ml80 වේ. ඊට වෙනස්ව, වැඩිහිටි ඉරිඟු කුරුමිණියන් (සයිටොෆිලස් සීමායිස්)81 තුළ AITC ඇසිටිල්කොලිනෙස්ටරේස් වළක්වයි. මදුරු කීටයන් තුළ අයිසෝතියෝසයනේට් ක්‍රියාකාරිත්වයේ යාන්ත්‍රණය පැහැදිලි කිරීම සඳහා සමාන අධ්‍යයනයන් සිදු කළ යුතුය.
අබ ඇට ආහාර වේල මගින් මදුරු කීට පාලනය සඳහා යාන්ත්‍රණයක් ලෙස ශාක ග්ලූකෝසිනොලේට් ජල විච්ඡේදනය ප්‍රතික්‍රියාශීලී අයිසෝතියෝසයනේට් සෑදීම සඳහා ක්‍රියා කරයි යන යෝජනාවට සහාය දැක්වීම සඳහා අපි තාප-අක්‍රිය DFP ප්‍රතිකාරය භාවිතා කරමු. පරීක්ෂා කරන ලද යෙදුම් අනුපාතවලදී DFP-HT බීජ ආහාර විෂ සහිත නොවීය. ලෆාර්ගා සහ වෙනත් අය. 82 වාර්තා කළේ ග්ලූකෝසිනොලේට් ඉහළ උෂ්ණත්වවලදී පිරිහීමට සංවේදී බවයි. තාප පිරියම් කිරීම බීජ ආහාරයේ ඇති මයිරොසිනේස් එන්සයිමය නිෂ්ක්‍රීය කිරීමට සහ ග්ලූකෝසිනොලේට් ජල විච්ඡේදනය ප්‍රතික්‍රියාශීලී අයිසෝතියෝසයනේට් සෑදීම වැළැක්වීමට ද අපේක්ෂා කෙරේ. ඔකුනේඩ් සහ වෙනත් අය විසින් ද මෙය තහවුරු කරන ලදී. 75 මයිරොසිනේස් උෂ්ණත්වයට සංවේදී බව පෙන්නුම් කළ අතර, අබ, කළු අබ සහ රුධිර මූල බීජ 80° ට වැඩි උෂ්ණත්වයකට නිරාවරණය වූ විට මයිරොසිනේස් ක්‍රියාකාරිත්වය සම්පූර්ණයෙන්ම අක්‍රිය වූ බව පෙන්නුම් කළේය. C. මෙම යාන්ත්‍රණයන් තාප-ප්‍රතිකාර කළ DFP බීජ ආහාරයේ කෘමිනාශක ක්‍රියාකාරිත්වය නැතිවීමට හේතු විය හැක.
මේ අනුව, අබ ඇට පිටි සහ එහි ප්‍රධාන අයිසෝතියෝසයනේට් තුන මදුරු කීටයන්ට විෂ සහිත වේ. බීජ පිටි සහ රසායනික ප්‍රතිකාර අතර ඇති මෙම වෙනස්කම් සැලකිල්ලට ගෙන, බීජ පිටි භාවිතය මදුරු පාලනය සඳහා ඵලදායී ක්‍රමයක් විය හැකිය. බීජ කුඩු භාවිතයේ කාර්යක්ෂමතාව සහ ස්ථායිතාව වැඩි දියුණු කිරීම සඳහා සුදුසු සූත්‍රගත කිරීම් සහ ඵලදායී බෙදාහැරීමේ පද්ධති හඳුනා ගැනීමේ අවශ්‍යතාවයක් පවතී. අපගේ ප්‍රතිඵලවලින් පෙන්නුම් කරන්නේ කෘතිම පළිබෝධනාශක සඳහා විකල්පයක් ලෙස අබ ඇට පිටි භාවිතයේ විභවයයි. මෙම තාක්ෂණය මදුරු වාහකයන් පාලනය කිරීම සඳහා නව්‍ය මෙවලමක් බවට පත්විය හැකිය. මදුරු කීටයන් ජලජ පරිසරවල වර්ධනය වන අතර බීජ පිටි ග්ලූකෝසිනොලේට් සජලනය මත එන්සයිමමය වශයෙන් ක්‍රියාකාරී අයිසෝතියෝසයනේට් බවට පරිවර්තනය වන බැවින්, මදුරුවන් ආසාදිත ජලයේ අබ ඇට පිටි භාවිතය සැලකිය යුතු පාලන විභවයක් ලබා දෙයි. අයිසෝතියෝසයනේට් වල කීට නාශක ක්‍රියාකාරිත්වය වෙනස් වුවද (BITC > AITC > 4-HBITC), බීජ පිටි බහු ග්ලූකෝසිනොලේට් සමඟ ඒකාබද්ධ කිරීම සහජීවනයෙන් විෂ වීම වැඩි කරයිද යන්න තීරණය කිරීම සඳහා තවත් පර්යේෂණ අවශ්‍ය වේ. මේද රහිත කුරුස බීජ පිටි සහ ජෛව ක්‍රියාකාරී අයිසෝතියෝසයනේට් තුනක මදුරුවන්ට කෘමිනාශක බලපෑම් පෙන්නුම් කරන පළමු අධ්‍යයනය මෙයයි. මෙම අධ්‍යයනයේ ප්‍රතිඵල මගින් නව මාවතක් විවර කර ඇත්තේ බීජ වලින් තෙල් නිස්සාරණය කිරීමේ අතුරු ඵලයක් වන මේද රහිත ගෝවා බීජ ආහාර වේල, මදුරු පාලනය සඳහා කීට නාශක කාරකයක් ලෙස ක්‍රියා කළ හැකි බවයි. මෙම තොරතුරු ශාක ජෛව පාලන කාරක සොයා ගැනීමට සහ ඒවා ලාභදායී, ප්‍රායෝගික සහ පරිසර හිතකාමී ජෛව පළිබෝධනාශක ලෙස සංවර්ධනය කිරීමට තවදුරටත් උපකාරී වේ.
මෙම අධ්‍යයනය සඳහා ජනනය කරන ලද දත්ත කට්ටල සහ ප්‍රතිඵල විශ්ලේෂණයන් සාධාරණ ඉල්ලීමක් මත අදාළ කතුවරයාගෙන් ලබා ගත හැකිය. අධ්‍යයනය අවසානයේ, අධ්‍යයනයේ භාවිතා කරන ලද සියලුම ද්‍රව්‍ය (කෘමීන් සහ බීජ ආහාර) විනාශ කරන ලදී.